Western Blot快速封閉液(1X) ED610總體效果優(yōu)于傳統(tǒng)的基于BSA(牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封閉液及國外同類產(chǎn)品，主要用于Western blot(WB)實(shí)驗(yàn)中PVDF膜或硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane，NC膜)的封閉，也可以用于Western實(shí)驗(yàn)中一抗或二抗的稀釋。封閉液快速。封閉時(shí)間通常僅需5-15分鐘，并且和BSA、脫脂奶粉、酪蛋白等傳統(tǒng)的Western封閉液以及國外同類的快速封閉液相比，顯示出更強(qiáng)的信噪比。封閉后背景低且不含血清和白蛋白，確保信噪比。
Western Blot快速封閉液(1X) ED610使用說明：
1.完成轉(zhuǎn)膜后，用Western洗滌液洗滌印跡膜1-2分鐘。
2.根據(jù)膜的大小，在平皿或者其它適當(dāng)容器中倒入一定體積的封閉液，確保封閉液后續(xù)能充分覆蓋膜即可。對(duì)于常規(guī)的western，一張約6.6×8.5cm的膜推薦使用約10ml左右的封閉液。
3.用平頭鑷夾住膜的一角，將膜放置在封閉液中，使封閉液*浸沒膜，置于水平搖床上封閉約10分鐘(通常5-15分鐘均可；經(jīng)多種抗體的測試封閉10分鐘的效果很多時(shí)候會(huì)顯著優(yōu)于常規(guī)的BSA封閉1小時(shí)的效果)。
4.封閉后的膜即可用于一抗孵育等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
Western Blot快速封閉液(1X) ED610用于PVDF膜及NC膜時(shí)的封閉時(shí)間為5-15分鐘。對(duì)于一些背景非常高的抗體，可以嘗試將封閉時(shí)間延長為30-60分鐘。此外，如有特殊需要，也*可以4C封閉過夜。由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實(shí)驗(yàn)體系的，因此對(duì)于一些特殊的實(shí)驗(yàn)，可能需要根據(jù)具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。取放PVDF膜和NC膜應(yīng)使用平頭鑷子，并僅輕輕夾取其邊角，操作過程須避免膜表面產(chǎn)生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。PVDF膜一經(jīng)浸潤和活化，需一直保持濕潤，根據(jù)Western進(jìn)行到的具體步驟可放置于western轉(zhuǎn)膜液或洗滌液等適當(dāng)溶液中，否則可能會(huì)產(chǎn)生難以封閉的異常背景。
